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　　概念： 细胞克隆形成率即细胞接种存活率， 表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。 贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆， 而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。 克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。 基本步骤： 1 、 取对数生长期的各组细胞， 分别用 0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在 1 0%胎牛血清的 DMEM 培养液中备用。 2、 将细胞悬液作梯度倍数稀释， 每组细胞分别以每皿 50、 1 00、 200 个细胞的梯度密度分别接种含 1 0mL 37℃预温培养液的皿中， 并轻轻转动， 使细胞分散均匀。 置 37℃ 5% C...

　　概念： 细胞克隆形成率即细胞接种存活率， 表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。 贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆， 而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。 克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。 基本步骤： 1 、 取对数生长期的各组细胞， 分别用 0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在 1 0%胎牛血清的 DMEM 培养液中备用。 2、 将细胞悬液作梯度倍数稀释， 每组细胞分别以每皿 50、 1 00、 200 个细胞的梯度密度分别接种含 1 0mL 37℃预温培养液的皿中， 并轻轻转动， 使细胞分散均匀。 置 37℃ 5% CO2 及饱和湿度的细胞培养箱中培养 2～3 周。 3、 经常观察， 当培养皿中出现肉眼可见的克隆时， 终止培养。 弃去上清液， 用PBS 小心浸洗 2 次。 加 4%多聚甲醛固定细胞 5mL 固定 1 5 分钟。 然后去固定液， 加适量 GIMSA 应用染色液染 1 0～30 分钟， 然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。 4、 将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片， 用肉眼直接计数克隆， 或在显微镜（低倍镜） 计数大于 1 0 个细胞的克隆数。 最后计算克隆形成率。 克隆形成率 =（克隆数/接种细胞数） ×1 00% 平板克隆形成试验方法简单， 适用于贴壁生长的细胞。 适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。 试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。 细胞一定要分散得好， 不能有细胞Kaiyun网站团， 接种密度不能过大。