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　　当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，-。%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气枯燥。

　　4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透亮胶片，用肉眼干脆计数克隆，或在显微镜〔低倍镜〕计数大于10个细胞的克隆数。最终计算克隆形成率。 克隆形成率 =〔克隆数/接种细胞数〕101%

　　平板克隆形成试验方法简洁，适用于贴壁生长的细胞。相宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验胜利的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞必须要分散得好，不

　　平板克隆形成试验方法简洁，适用于贴壁生长的细胞。相宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验胜利的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞必须要分散得好，不能有细胞团，Kaiyun平台 官方入口接种密度不能过大。

　　(1)取对数生长期细胞，%胰蛋白酶消化并轻轻吹打，使之成为单细胞，作活细胞计数，用含20%胎牛血清的DMEM造就液调整细胞密度至1106细胞/L。然后依据试验要求作梯度倍数稀释。

　　(2)%%两个浓度的低溶点琼脂糖液，高压灭菌后，维持在40℃中不会凝固。

　　(3)按1:%的琼脂糖和2DMEM造就基(含有2抗生素和20%的小牛血清)混合后，取3mL混合液注入直径6cm平皿中(10cm平皿加7～10mL)，冷却凝固，可作底层琼脂置CO2温箱中备用。

　　(4)按1:%的琼脂糖和2DMEM造就基在无菌试管中相混以后，，充分混匀，%琼脂糖底层平皿中，逐形成双琼脂层。待上层琼脂凝固后，Kaiyun平台 官方入口置入37℃ 5%CO2温箱中造就10～14天。 (5)把平皿放置在倒置显微镜下，视察细胞克隆数。计算形成率。 软琼脂造就法常用检测肿瘤细胞和转化细胞系。试验中琼脂与细胞相混时，琼脂温度不宜超过40℃。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个，一般6cm的平皿接种1010个细胞。正常细胞在悬浮状态下不能增殖，不适用于软琼脂克隆形成试验。 软琼脂集落形成率试验(软琼脂克隆)

　　％低熔点琼脂糖与2细胞造就基以1:1 ％的底层琼脂，6 温室凝固，取对数期细胞，胰酶消化后吹散成单