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　　当单个细胞在体外增殖6代以上，后来辈所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，-。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各样理化因素可能致使细胞的克隆形成能力发生改变

　　当单个细胞在体外增殖6代以上，后来辈所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，-。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各样理化因素可能致使细胞的克隆形成能力发生改变。经过一定的实验方法能够对细胞的克隆形成能力进行检测。

　　细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反应细胞群体依靠性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大：

　　一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转变细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。

　　软琼脂集落形成实验：本法合用于非锚着依靠性生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转变细胞系。

　　1、取对数生长久的各组细胞，%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。

　　2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分别平均。置37℃5%CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。

　　3、经常察看，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，Kaiyun网站加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水迟缓洗去染色液，空气干燥。

　　4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。

　　平板克隆形成试验方法简单，合用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的重点是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分别得好，不

　　平板克隆形成试验方法简单，合用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的重点是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分别得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。

　　(1)取对数生长久细胞，用 %胰蛋白酶消化并轻轻吹打，使之成为单细胞，作

　　活细胞计数，用含 20%胎牛血清的DMEM培养液调整细胞密度至 1106细胞/L。