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:在牛乳腺上皮细胞、成纤维细胞模型中,可促进细胞增殖,提升细胞活力;对牛免疫细胞(如外周血单核细胞)则表现为轻度抑制增殖作用,参与免疫细胞的活化调控。
,促进 ERK1/2 的磷酸化,进而调控细胞周期相关基因的表达;同时可轻度抑制 cAMP/PKA 通路,参与细胞代谢的微调。
:C 端 Tyr 的酚羟基可清除少量活性氧(ROS),减轻氧化应激对细胞的损伤,在牛肝细胞氧化损伤模型中表现出一定的保护效果。
:该肽段的生物活性具有明显物种偏好性,在牛源细胞中活性显著,在人源、鼠源细胞中活性较弱或无活性。
该肽段的生物活性基于与细胞表面蛋白的静电结合及下游信号通路的调控,核心机制如下:
N 端双 Lys 的正电荷与细胞表面酸性蛋白(如整合素、糖蛋白)的负电荷区域形成静电相互作用,介导肽段与细胞的结合;C 端 Tyr 的酚羟基进一步增强与靶蛋白的疏水相互作用,提升结合特异性。
:肽段结合靶蛋白后,通过 G 蛋白偶联受体(GPCR)介导的信号传递,激活 Ras 蛋白,进而促进 MAPK 通路的 ERK1/2 磷酸化;磷酸化的 ERK1/2 入核后,上调细胞周期蛋白 D1(Cyclin D1)的表达,推动细胞从 G₁期进入 S 期,促进细胞增殖。
:C 端 Tyr 的酚羟基可提供氢原子,清除细胞内的超氧阴离子、羟自由基等 ROS;同时可上调细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性,增强细胞自身的抗氧化能力。
:用于解析牛 β- 促脂素不同片段的生物学功能,明确 39-45 位肽段在整体蛋白中的作用,是反刍动物内分泌肽研究的工具分子。
:在牛乳腺上皮细胞、成纤维细胞体外培养中,可作为轻度促增殖添加剂,提升细胞贴壁率和传代效率,适用于牛体细胞克隆、乳腺生物反应器构建等研究。
:通过与人源、鼠源 β- 促脂素同源片段的活性对比,探索 β- 促脂素的物种进化差异,为比较内分泌学研究提供数据支持。
:通过基因工程手段敲除牛 β- 促脂素的 39-45 位编码序列,对比野生型与突变型蛋白在牛体内的表达及活性差异,明确该片段对 β- 促脂素整体功能的影响;通过体外肽段孵育实验,验证其独立的生物活性。
:在牛乳腺上皮细胞培养基中添加 1-10 μmol/L 的 β-Lipotropin (39-45) (bovine),通过 CCK-8 法检测细胞活力,流式细胞术分析细胞周期,评估其促增殖效果;该浓度下无明显细胞毒性,可提升细胞传代次数。
:合成人源、鼠源 β- 促脂素 39-45 位同源肽段,分别在对应物种的细胞模型中检测活性,对比分析肽段序列差异与活性差异的关联性,探索进化过程中 β- 促脂素功能的分化规律。
:对比实验证实,牛源 β-Lipotropin (39-45) 在牛乳腺上皮细胞中的促增殖活性是鼠源同源片段的 3 倍,人源同源片段在牛细胞中则无活性,表明该肽段的功能具有严格的物种特异性。
:对 C 端 Tyr 进行磷酸化修饰(pTyr)后,肽段对 MAPK 通路的激活效率提升 2 倍,促细胞增殖活性显著增强;磷酸化修饰后的肽段可作为细胞信号通路研究的工具分子。
:将该肽段与牛乳腺靶向肽(如乳清蛋白衍生肽)融合,构建的融合肽可特异性富集于牛乳腺组织,在牛乳腺发育研究中具有潜在应用价值。
:在牛乳腺上皮细胞体外培养实验中,添加 5 μmol/L 的 β-Lipotropin (39-45) (bovine) 后,细胞活力提升 30%,S 期细胞比例从 15% 提升至 25%,细胞贴壁率提升 20%,证实其具有显著的促增殖效果。
:在牛成纤维细胞中,加入 10 μmol/L 该肽段后,ERK1/2 的磷酸化水平在 30 分钟内达到峰值,是对照组的 2.5 倍;加入 MAPK 通路抑制剂 U0126 后,促增殖作用完全消失,证实其活性依赖 MAPK 通路激活。
:将牛源、鼠源、人源 β-Lipotropin (39-45) 同源肽段分别作用于牛乳腺上皮细胞,仅牛源肽段表现出促增殖活性,鼠源肽段活性微弱,人源肽段无活性,验证了其物种特异性。













